Контрфарби створюють загальне враження про морфологію тканини і можуть бути ядерними або цитоплазматичними – найчастіше першими. Вони не є основними і їх використання є індивідуальним вибором.
Він допомагає відрізнити грампозитивні та грамнегативні бактерії, забезпечуючи контрастне забарвлення первинної плями. Контрастне фарбування необхідне, оскільки воно дозволяє візуалізувати та класифікувати бактерії на основі властивостей їх клітинної стінки.
counter·ter·stain -ˌstān. : пляма, яка звикла кольорові частини мікроскопічного зразка, не уражені іншим фарбуванням. зокрема: цитоплазматичне фарбування, яке використовується для контрастування або посилення ядерного фарбування.
Лічильник плям, сафранінвикористовується для фарбування клітин, які втратили первинне фарбування, інакше вони залишаться безбарвними, і ви не зможете їх побачити.
Еозин є найбільш часто використовуваним протизабарвленням, яке розрізняє цитоплазму та ядра клітин. Він, як правило, рожевий, з різними відтінками рожевого для різних типів волокон сполучної тканини. Еозин Y є найбільш часто використовуваною формою еозину і може використовуватися як у воді, так і в спирті.
Для фарбування цих грамнегативних клітин у рожевий колір використовується сафранін. Однак, якщо контрфарбування сафраніном було забуто, грамнегативні бактерії залишаться незабарвленими, оскільки оригінальну кристалічно-фіолетову пляму було б видалено під час промивання етанолом, і жодних додаткових плям не було б застосовано.